總睪固酮包含與性激素結合球蛋白（SHBG）緊密結合、與白蛋白鬆散結合，以及游離的部分；自由睪固酮通常指未與蛋白質結合的部分。SHBG 改變時，總睪固酮可能與可利用的睪固酮呈現不同變化，因此在特定臨床情境中，單看總睪固酮可能不足以解釋症狀。
自由睪固酮的測量與計算也有方法學限制。直接免疫分析、平衡透析與計算值不可任意互換；女性低濃度範圍的測量尤其需要可靠方法。檢驗結果必須附上方法與實驗室參考區間。
思與行
- 在每筆檢驗紀錄中標明總量或自由量、檢驗方法、SHBG、單位及參考區間。
- 不將某篇研究建立的自由睪固酮切點當成所有實驗室都適用的標準。